?
Electron microscopy analysis of ATP-independent nucleosome unfolding by FACT
FACT является шапероном гистонов, который участвует в удалении и повторной сборке нуклеосом во время транскрипции и репликации. Мы использовали электронную микроскопию для изучения комплексов FACT, FACT:Nhp6 и FACT:Nhp6:нуклеосома и обнаружили, что все комплексы принимают широкий диапазон конфигураций, что указывает на высокую гибкость. Мы неожиданно обнаружили, что ДНК-связывающий белок Nhp6 также связывается с С-концевыми хвостами субъединиц FACT, индуцируя более открытую геометрию FACT даже в отсутствие нуклеосом. Следовательно, Nhp6 поддерживает развертывание нуклеосом путем изменения как структуры FACT, так и свойств нуклеосом. Комплексы, образованные с FACT, Nhp6 и нуклеосомами, также продуцируют широкий спектр структур, обнаруживая большое количество потенциальных промежуточных соединений вдоль предполагаемого пути разворачивания. Данные предполагают, что Nhp6 играет несколько ролей до и во время разворачивания нуклеосом с помощью FACT, и что этот процесс протекает через ряд энергетически сходных промежуточных структур, что в конечном итоге приводит к экстенсивно развернутой форме.