?
Оптимизация условий перфузии в микрофлюидной модели плаценты-на-чипе
Разработка и создание модели плаценты-на-чипе востребовано в разных областях клеточной биологии, особенно в исследованиях молекулярных механизмов патогенеза болезней и действия потенциальных лекарственных средств. В настоящее время для изготовления микрофлюидных устройств из термопластов чаще всего используют метод фрезерования. Однако эта технология приводит к формированию нежелательной шероховатости поверхности, способствующей образованию воздушных пузырей и снижающей оптическую прозрачность полимера. В связи с этим назрела необходимость в усовершенствовании технологии изготовления чипов и их эксплуатации. Нами проанализированы различные способы модификации поверхности поликарбонатного чипа и дальнейшей оптимизации контура. Показано, что эффективно удаляет шероховатости с поверхности поликарбонатного чипа паровая обработка препаратом JINHF (JINHF, Китай). Подобранный метод для обработки поверхности значительно уменьшает шероховатость внутренних каналов, что способствует заполнению чипа без образования областей с трудноудаляемыми пузырями воздуха. В процессе оптимизации были изучены два “пассивных” метода по устранению пузырей из микрофлюидной системы: вертикальное позиционирование чипа и создание ловушки для пузырей в конструкции чипа. Проведено сравнение этих способов с “активным” методом удаления пузырей ‒ путем подключения ловушки Elveflow (Elveflow Elvesys, Франция) с вакуумным насосом к чипу. Метод вертикального позиционирования органа-на-чипе во время культивирования оказался более эффективным для удаления пузырей воздуха, чем встроенная и внешняя ловушки. Разработанный вариант микрофлюидного устройства при конфигурации контура, показавшего наилучший результат, апробирован на процессе длительного культивирования клеток BeWo b30 и EA.hy926 как моделей плаценты-на-чипе в динамике.